l 說明:
PVDF膜通常都需要酒精預濕(Prewet)、洗滌。這些操作一方面需在無菌條件下完成,過程繁雜;另一方面,洗滌如果不徹底,膜上殘留的乙醇對抗體的包被乃至后續(xù)細胞因子檢測等均有不同程度的影響。為了幫助廣大的ELISPOT實驗操作人員減輕工作強度、節(jié)省寶貴的時間,同時也為了減少污染的機會,達科為公司經過不懈地努力與反復地驗證,終于研發(fā)出了有自主知識產權的PVDF膜ELISPOT包被抗體緩沖液Magi? Coating Buffer(貨號DKW01-0030),能夠免除酒精預濕和洗滌的步驟,同時有效保護包被抗體。
l 使用方法:
Magi? Coating Buffer的使用方法極簡單:先取15μl Magi? Coating Buffer潤濕PVDF孔,待孔完全潤濕之后(只要Magi? Coating Buffer接觸到了孔底,會在2-3秒之內完全潤濕整個孔,膜的顏色變得透亮)然后加入50μl 經PBS稀釋過的包被抗體,4?C包被過夜。見前面的“方案A Magi? Coating Buffer潤濕包被程序”,這種方法省去了預濕之后的洗滌步驟,也能得到和傳統(tǒng)酒精預濕一樣的效果。
l 注意事項:
2 抗體凍干粉仍然用去離子水溶解。千萬不要用Magi? Coating Buffer來溶解凍干粉!
2 包被抗體應該在使用前才稀釋,隨用隨稀釋。因為抗體稀釋之后,濃度變低,穩(wěn)定性下降。
2 4?C包被過夜(12-24小時,通常18小時)是經過優(yōu)化的包被條件,我們不推薦室溫或者37?C的快速包被。
Magi? Coating Buffer 4?C可以保存一年,注意保持無菌。
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